北京市化工职业病防治院电离辐射风险评估实验室位于亦庄经济开发区北工大软件园内,实验室面积约平方米,先后投入余万元建设,主要配备的大型仪器设备包括小动物成像仪、高通量全自动核酸分离纯化仪、流式细胞仪、伯乐蛋白纯化仪、ABI荧光定量PCR仪、酶标仪、病理切片机、自动扫描显微系统、荧光显微镜、蛋白纯化仪、细胞培养系统等,涵盖了分子生物学、细胞生物学、组织病理实验平台及动物实验检测平台。
实验室主要开展职业病相关危害因素分子生物学机制研究,近两年在研课题有低剂量电离辐射分子机制研究、有毒物对细胞代谢基因表达影响研究、职业噪声性听力损伤分子机制研究等。
实验室始终致力于职业卫生领域分子生物学、细胞生物学研究科研平台搭建,为我国职业健康事业发展贡献自己的力量。现开放共享,欢迎各科研院所、大中院校、企事业单位洽谈合作。
实验室平台建设
1.分子生物学实验平台
1)基因表达和修饰检测
提取细胞、组织或血液中的mRNA,microRNA,检测浓度进行RT-PCR,Real-timePCR检测目的基因表达高低;
提取细胞、组织或血液中的DNA,PCR扩增,可以建立基因文库,基因克隆。
基因修饰,如甲基化检测等。
2)蛋白表达检测
提取细胞、组织或血液中的蛋白,进行Western-blot实验,检测蛋白表达高低。
3)基因表达的调节
通过构建基因的RNA干扰载体敲降目的基因表达;在蛋白水平检测敲降效果;通过基因克隆,构建正义表达载体,使目的基因过表达,在蛋白水平检测转染效果。
4)蛋白相互作用检测
通过免疫共沉淀检测蛋白在体内的相互作用;通过GST-PULLDOWN检测蛋白体外相互作用。
5)蛋白与核酸相互作用(基因表达调控)
通过EMMSA和CHIPONCHIP实验可以检测蛋白对基因表达的调控。
6)蛋白表达修饰检测,如磷酸化,乙酰化,sumo化等。
2、细胞生物学实验平台
1)开展常规的细胞培养;
2)观察细胞形态学的变化,如贴壁能力、迁移运动、细胞连接等(细胞动态分析仪);
3)检测细胞生物学行为的变化,包括细胞周期、细胞凋亡、衰老等(流式细胞仪);
4)细胞生长、增殖能力的变化(酶标仪、细胞动态分析仪)
5)通过免疫细胞化学、免疫荧光,检测目的蛋白的表达和位置(倒置荧光显微镜)。
液氮罐
洁净工作台
细胞培养箱
奥林巴斯荧光显微镜
BD流式细胞仪
TECAN酶标仪
6)开展细胞转染、大肠杆菌感受态的制备、质粒提等。
4D细胞核转染系统
恒温摇床
3、组织病理实验平台
1)组织病理切片的制作(切片机)
2)组织水平蛋白表达检测
通过免疫组化可以检测大样本量临床组织切片中目的蛋白的表达,进行统计学分析。数字切片扫描系统可以同时检测一张切片上多个目的蛋白的表达;
通过酶联免疫吸附(ELISA)实验可以检测细胞或组织样本(如外周血)中相关目的蛋白的表达。
M8数字切片扫描系统
TECAN酶标仪
4、动物实验平台
可以进行动物饲养完成后,组织标本等取材后相关的细胞和分子生物学实验。
小动物活体成像
5、基因检测平台
可以开展疾病相关基因的检测(科研和对外服务)
1)全自动核酸提取仪,可以高通量的对外周血中的核酸进行提取,如游离肿瘤细胞。
2)样本质控系统对核酸质量进行检测,构建PCR体系。
3)用基因测序仪可以进行目的基因测序/DNA片段分析。
样本转移质控系统
凯杰全自动核酸提取工作站
6、其他大型设备
可以达到,rpm,,xg的RCF,可以用于生物大分子,细胞器和病毒等的分离。
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